Expression of the Immunohistochemical Markers p16 and Ki-67 and Their Usefulness in the Diagnosis of Cervical Intraepithelial Neoplasms / Reprodutibilidade do diagnóstico das neoplasias intraepiteliais cervicais e a influência dos marcadores imuno-histoquímicos p16 e Ki-67 como ferramentas auxiliares

Objective The aim of this study was to determine the expression of the immunohistochemical markers p16 and Ki-67 in cervical intraepithelial neoplasms and their influence on the level of agreement among different observers and for the same observer. Methods The study included 184 patients with cervical intraepithelial neoplasms previously confirmed through biopsies performed between 2005 and 2006. Three pathologists reviewed the biopsies by using hematoxylin-eosin staining to reach a consensus on the diagnosis. Subsequently, an immunohistochemical study analyzed the expression of p16 and Ki-67 in such cases. Results The comparison among the reviewing pathologists revealed only moderate agreement (kappa = 0.44). The agreement improved when the differentiation of highgrade lesions (cervical intraepithelial neoplasm - CIN - 3) was analyzed (kappa = 0.59). p16 staining exhibited a high negative predictive value and sensitivity; however, the specificity was low. Overall, both qualitative and quantitative analyses of p16 and a quantitative analysis Ki-67 exhibited low accuracy. The agreement among diagnoses before immunohistochemistry was 0.47. The use of immunohistochemistry increased the agreement to 0.68. Conclusion Our study showed that the agreement among observers using traditional diagnostic criteria of cervical intraepithelial lesions can improve with the use of immunohistochemistry.

Objetivo Observar a expressão dos marcadores imuno-histoquímicos p16 e Ki-67 em neoplasias intraepiteliais cervicais e sua influência na concordância entre observadores diferentes e, entre o mesmo observador. Métodos Foram incluídas no estudo 184 pacientes com neoplasias cervicais intraepiteliais confirmadas por biópsia realizadas durante os anos de 2005 e 2006. As biópsias foram revistas, primeiramente, por três patologistas utilizando-se apenas a coloração de Hematoxilina-Eosina. Foi realizado um consenso acerca do diagnóstico. Posteriormente, foi realizado o estudo imuno-histoquímico e analisada a expressão de p16 e Ki- 67 nesses casos. Resultados A comparação entre os patologistas revisoresmostrou uma concordância apenas regular (k = 0,44. A concordância foi melhor quando analisada apenas a capacidade de diferenciar lesões de alto grau (NIC 3) (k = 0,59). A marcação de p16 mostrou alto valor preditivo negativo e sensibilidade, porém baixa especificidade. Em geral, tanto p16 qualitativo, quanto p16 quantitativo e Ki-67 quantitativo mostraram baixa acurácia geral. A concordância entre os diagnósticos antes da imuno-histoquímica obteve k = 0,47, e após o auxílio da imuno-histoquímica houve um aumento do Kappa para 0,68. A marcação de p16 mostrou alto valor preditivo negativo e sensibilidade, porém baixa especificidade. Em geral, tanto p16 qualitativo, quanto p16 quantitativo e Ki-67 quantitativo mostraram baixa acurácia geral. Conclusão Nosso estudo mostrou que a concordância no diagnóstico tradicional de lesões intraepiteliais cervicais é regular e que pode ser melhorada como o auxílio da imuno-histoquímica.

The interaction between aromatase, metalloproteinase 2,9 and cd44 in breast cancer / A interação entre aromatase, metalloproteinase 2, 9 e cd44 no câncer de mama

OBJECTIVE: This study intends to verify the expression levels and correlation of aromatase, matrix metalloproteinase 2 (MMP-2), matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) and CD44 in ductal carcinoma in situ (DCIS) and infiltrating ductal carcinoma (IDC) when both are found in the same breast. METHODS: One hundred and ten cases were evaluated by tissue microarray (TMA) and immunohistochemically screened with anti-aromatase polyclonal antibodies, anti-MMP-2 monoclonal antibodies, anti-MMP-9 policlonal antibodies and anti-CD44 monoclonal antibodies. RESULTS: Aromatase was expressed in IDC and DCIS in 63 (57.3 percent) and 60 (67 percent) of the cases respectively; MMP-2 was similarly expressed in IDC and DCIS in 15 (13.60 percent) cases; MMP-9 was positively expressed in IDC and DCIS in 83 (75.50 percent) and 82 (74.50 percent) cases, respectively; CD44 was positively expressed in IDC and DCIS in 49 (44.50 percent) and 48 (42.60 percent) of the cases, respectively; all of them were highly correlated (p<0,001). The correlation analysis found positive, statistically significant correlation, in IDC between aromatase and MMP-2 (p<0.001) and between aromatase and MMP-9 (p=0.034). Positive correlation between aromatase and MMP-2 (p<0.001) and between MMP-9 and CD44 (p=0.030) were found in DCIS. CONCLUSION: These results allow us to conclude that aromatase through local estrogen synthesis in breast tissue plays an important role in breast carcinogenesis, mainly influencing MMP-2 and MMP-9 which are important participants in tumor cell invasion and dependence of their connection to CD44 for action.

OBJETIVO: O objetivo desse estudo é verificar as expressões e correlações da aromatase, metalloproteinase 2 da matriz (MMP2), metalloproteinase 9 da matriz (MMP-9) e CD44 no carcinoma ductal in situ (CDIS) e carcinoma ductal infiltrativo (CDI) quando ambos estão presentes simultaneamente na mesma mama. MÉTODOS: Foram avaliados 110 casos pelo método de tissue microarray (TMA) e através da utilização de anticorpos policlonais antiaromatase, anticorpos monoclonais anti-MMP-2, anticorpos policlonais anti-MMP-9 e anticorpos monoclonais anti-CD44. RESULTADOS: A aromatase estava expressa de forma positiva no CDI e CDIS em 63 (57,3 por cento) e 60 (67 por cento) casos, respectivamente. A expressão de MMP-2 estava expressa de forma positiva em 15 (13,6 por cento) casos tanto no CDI, quanto no CDIS. A expressão da MMP-9 estava expressa de forma positiva em 83 (75,5 por cento) e 82 (74,5 por cento) casos de CDI e CDIS, respectivamente. A expressão de CD44 estava expressa de forma positiva em 49 (44,5 por cento) e 48 (42,6 por cento) casos de CDI e CDIS, respectivamente. Todos eles apresentando alta correlação (p<0,001). Na avaliação de correlação foi encontrada correlação positiva estatisticamente significante no CDI entre aromatase e MMP-2 (p<0,01) e entre aromatase e MMP-9 (p=0,034). Nos casos de CDIS houve correlação positiva estatisticamente significante entre aromatase e MMP-2 (p<0,001) e entre CD44 e MMP-9 (p=0,030). CONCLUSÃO: Após analisarmos os resultados de nosso estudo, podemos concluir que a aromatase, através da síntese de estrogênio local no tecido mamário, desempenha importante papel na carcinogênese mamária, principalmente influenciando a atuação da MMP-2 e da MMP-9, grandes responsáveis pela invasão celular tumoral que, por sua vez, provavelmente dependem de sua ligação a CD44 para poder desempenhar suas funções.

Experimental strabismus surgery using triamcinolone: outcomes and effects on inflammatory response

PURPOSE: To evaluate the efficiency of triamcinolone (TRI) in limiting the postoperative inflammatory response and scarring after strabismus surgery. METHODS: A prospective, two-stage, masked, controlled trial was conducted. In the first stage, the inflammatory response at the extraocular muscle reattachment site was analyzed after superior rectus recession in ten rabbits. In the second stage, TRI (40 mg/ml) was applied during surgery to the eyes of 16 rabbits with superior rectus recession. As a control, contralateral eyes were treated with physiological saline. Fifteen days later, exenteration was performed, and the sites of muscle reattachment were processed for histological examinations. The sums of the areas of the granulomas in the extraocular muscle reattachment sites of control and treated eyes were compared. RESULT: There was a preliminary inhibition effect of TRI on the inflammatory response of treated eyes compared with that of control eyes. CONCLUSIONS: In the conditions of conducting this study the introperative use of TRI was effective in controlling the postoperative inflammatory response in rabbit eyes after extraocular muscle surgery.

OBJETIVO: Avaliar a eficiência da triancinolona (TRI) como agente modulador da resposta inflamatória e cicatricial em coelhos submetidos à cirurgia de estrabismo. MÉTODOS: Foi realizado estudo prospectivo, mascarado, em dois estágios. No primeiro estágio 10 coelhos foram submetidos a retrocesso do músculo reto superior em ambos os olhos, aplicando-se triancinolona (40 mg/ml) em um dos olhos e como controle, solução salina nos olhos contralaterais. Quinze dias e trinta dias após, os animais foram exenterados e o material do sítio de reinserção muscular foi submetido à análise qualitativa e quantitativa. No segundo estágio, com incrementação da agressão cirúrgica, 16 coelhos foram submetidos aos mesmos procedimentos com exenteração e análise dos tecidos após 15 dias. RESULTADO: Houve efeito inibitório da TRI na resposta inflamatória dos olhos tratados quando comparados aos olhos-controle. CONCLUSÕES: Nas condições de realização do presente estudo o uso per-operatório da TRI foi efetivo no controle da resposta inflamatória em olhos de coelhos submetidos à cirurgia de estrabismo.

Tracheotomy in growing rats: histological aspects

PURPOSE: To compare morphologically three different types of tracheotomy in growing rats, applying microsurgical technique. METHODS: EPM-1 Wistar growing rats (n=57) weighing 88gm and aged 35 days were randomized in four groups, according tracheotomy incision type (longitudinal, transverse and tracheal segment excision), and sham group. Following intramuscular anesthesia with ketamine and xylazine, the trachea was exposed and incised, according to the group, and a hand-made endotracheal cannula was inserted into the organ, under sterile conditions. This cannula was removed after 7 days, and animals have been sacrificed 30 days later. Tracheas samples were submitted to histological study, stained by hematoxylin-eosin and Masson trichrome, evaluating fibrosis, inflammatory infiltrate and epidermoid metaplasia. RESULTS: There was more frequency of inflammatory infiltrate at the tracheal epithelium in the tracheal segment excision group (87 percent) compared to the longitudinal (40 percent) and transverse (36 percent) incision groups (p=0.009). Evaluating epidermoid metaplasia, tracheal segment excision and the longitudinal groups presented 33 percent and 40 percent, respectively, compared to 0 percent of the transverse group (p=0.03). Concerning to fibrosis, in a global comparison (p=0.1) among the three groups there was no difference, however, compared to the longitudinal group the transverse group showed lower level of fibrosis (p=0.04). Sham group did not present any relevant morphologic alterations and it was used as reference pattern. CONCLUSION: Taken together, our data show that tracheal segment excision promotes more epithelium aggression and transverse tracheal incision shows less morphologic alterations.

Toxoplasmose ocular: utilizaçäo de reaçäo imuno-histoquimica para diagnóstico / Ocular toxoplasmosis: utilization of immunohistochemistry in the diagnosis of ocular toxoplasmosis

O diagnóstico de toxoplasmose ocular baseia-se geralmente em dados clinicos e laboratoriais bastante conhecidos. Porém, casos com apresentaçäo clinica atipica ocorrem, principalmente em pacientes imunossuprimidos, trazendo entäo ao médico clinico dificuldades diagnósticas. Os autores descrevem o caso de uma paciente do sexo feminino, com uma doenca ocular bilateral, de tres anos de duracao, em evoluçäo e sem diagnóstico etiológico estabelecido. Após exaustiva investigaçäo clinica e laboratorial e utilizaçäo de vários medicamentos, sem sucesso clinico, optou-se pela enucleaçäo de olho esquerdo, ja atrofico...

Aspectos clínico-patológicos da malária falciparum grave: a propósito de um caso / Clinical and pathological aspects of severe falciparum malaria: a propos of a case

Apresentamos um caso final de malária falciparum com discussäo das alteraçöes clínico-patológicas e síntese de fisiopatologia da malária falciparum grave. Aspectos histopatológicos dos vários órgäos säo apresentados e também ultra-estrutura de vasos cerebrais